SNP拷贝数和杂合性估计的损失
计算SNP拷贝数和损失的杂合性(LOH)的基础上 和基因SNP芯片数据为成对目标/正常样本.
在癌症基因组拷贝数变化的遗传不稳定性共同的特点之一
对大多数人类癌症和肿瘤抑制基因的LOH的发展是一个至关重要的一步 零星的和遗传性癌症(蒙蒂,2005).
步骤1: SNPFileCreator
SNPFileCreator玻璃纸文件从一个数组转换成GenePattern.snp文件.
Raw每个SNP探测器的探测数据集转换为一个
每个SNP单一强度值使用四种建模算法:
平均差异,点/毫米差异模型(dChip默认),中间调查, 或削减意味着.
20-30 分钟: 处理本例GenePattern公共服务器上需要时间.
源数据,生成的SNP文件在这里为你提供方便:
GISTIC_Hind_subset.zip, GISTIC_Hind_subset.snp.
注意事项
- SNPFileCreator接受移动电话文件从500 k阵列晶片组(250 k猪圈,250 k NSP )或 100 k阵列晶片组(50 k Xba,50 k后).
每个晶片组使用两个独特的高密度阵列在500000年和100000年的单核苷酸多态性基因型在一次实验中,分别。模块的玻璃纸文件转换成一个数组。snp文件创建一个。snp芯片文件设置使用MergeRows模块结合起来。两个数组的snp文件。
- SNPFileCreator可以转移玻璃纸GenePattern服务器进行处理或文件 从网络读取的文件目录。由于文件的大小,是最佳实践 存储移动电话网络目录中的文件和处理它们的目录。
- SNPFileCreator生成写道。snp网络目录或文件 GenePattern服务器。通常,编写文件GenePattern服务器提供 更大的灵活性,使GenePattern管道文件可供使用。
- SNPFileCreator创建一个。snp文件有两种格式: 非Allele-Specific(默认)或Allele-Specific。 对于每个样本,非Allele-Specific格式包含一个强度值 和基因型调用;Allele-Specific格式包含一个 强度值为等位基因,强度值B等位基因和基因型的电话。 所有GenePattern模块接受非Allele-Specific格式;许多还不接受Allele-Specific格式。
- SNPFileCreator使用人类基因组的2004年5月(hg17)包括 染色体中的列和物理位置。snp文件。默认情况下,这类单核苷酸多态性 通过染色体和物理位置,根据SnpViewer模块。
Step 2: XChromosomeCorrect
性别样本,XChromosomeCorrect模块运行正确的强度值X染色体snp。 对于每个样本男性捐赠者,模块双打在X染色体snp的强度值.
样例文件必须的信息 包括一个列标记为性别,包含一个值M或F为每个样本.
步骤三
: CopyNumberDivideByNormals
CopyNumberDivideByNormals计算每个目标SNP的原始拷贝数除以其强度值 意味着强度值的所有正常的SNPs。这种计算称为 拷贝数标准化或正常化法线。
CopyNumberDivideByNormals创建两个文件之一:
- . cn(默认)不包括基因型。
- 。xcn包括下电话。SnpViewer模块需要基因型检测和显示LOH.
步骤四
: 查看器
SnpViewer显示SNP拷贝数和杂合性丧失使用热图(LOH)数据。 默认情况下,该查看器显示所有染色体。放大一个染色体,选择它的 染色体在浏览器工具栏下拉列表。对染色体的一个区域放大, 选择 缩放 在 工具,点击热图.
注意事项
- 查看。xcn或. cn文件在您的本地驱动器上,运行SnpViewer没有指定 任何参数。当观众开始,使用文件菜单文件加载到观众。 如果你指定一个本地文件作为参数SNPViewer模块, GenePattern GenePattern服务器复制文件,可耗时大 。xcn或. cn文件.
- 检测并显示LOH电话, 需要电话基因型(SnpViewer模块。xcn文件格式)。的LOH调用:
- 失:AB在正常和A或B的目标.
- 保留:AB在正常和目标或没有电话在正常和AB的目标.
- 冲突:A或B在正常和AB的目标.
- 欠/不叫:A或B在正常或不叫正常或目标.
- 默认情况下,该查看器显示所有染色体。放大一个染色体,选择它的 染色体在浏览器工具栏下拉列表。对染色体的一个区域放大, 选择<我>放大< / i >工具并点击热图。
- 分类样本的拷贝数放大或删除:放大染色体;选择
定义一个感兴趣的区域< / i >工具;在热图,单击开始感兴趣的地区 然后结束该地区;红色栏左边的热图定义感兴趣的地区; 右键单击并选择红酒吧 的放大 或者 的删除.
引用
蒙蒂,s . 2005。类幻灯片:SNP芯片和高密度基因分型。 http://www.chip.org/teaching/hst950/slides/class6.pdf.