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基因工程小鼠的表达研究

项目名称

基因工程小鼠的表达研究

项目等级

5

项目类型

模式动物

开始时间

2008-12-11 10:58:38

项目简介

小鼠基因剔除作为一种有效的实验手段,已被广泛地用于解析人类基因功能、探索人类疾病的机制。

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项目详情

小鼠基因剔除作为一种有效的实验手段,已被广泛地用于解析人类基因功能、探索人类疾病的机制。然而包括条件性基因剔除方法在内的实验策略,都是定点地将靶基因进行破坏,其效果是单向的、一次性的,无法实现对小鼠内源基因的可逆调控。因此,这一技术不适合回答在发育或疾病过程中,靶基因作用的时间窗口,也无法回答基因缺失导致的表型异常是否可以简单地通过恢复该基因的功能来消除。另一方面,基因剔除实验中靶基因长时间缺失导致的功能代偿常会误导人们对于该基因功能的认识。


最近,同济大学、中国科学院上海生命科学研究院、上海南方模式生物研究中心组成的科研团队证明,将四环素响应元件(TRE)定点插入到靶基因内含子中,可以在不影响基因功能的前体下通过一种人工转录沉默因子tTS轻松实现对靶基因的开关调控(Nucleic Acids Res. 2015 Feb 18;43(3):1549-61.;Nucleic AcidsRes. 2012 Nov;40(21):e166)。tTS由大肠杆菌四环素操纵子阻遏蛋白tetR和人类KRAB蛋白结构域(Kru¨ppel-associated box)融合组成,tTS可以专一性地识别TRE位点,并招募多种表观调控蛋白对靶基因的表达进行抑制。研究表明,采用这一系统其关闭靶基因的效率高达97%以上,而只要在小鼠饮水中加入四环素就可以迅速而完全地恢复靶基因在小鼠体内的表达水平,实验证明这一开关效果可以反复多次。上述技术为人们更加精细地研究基因功能提供了一种新的手段。


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